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液相色谱法适用于分离生物和医学大分子和离子化合物、不稳定天然产物、各种其他聚合物和不稳定化合物。

在使用液相色谱仪时,整个液相系统中有两个地方容易产生气泡!

1、泵头吸入白管。

2、检测口流动池。

产生气泡的原因:温度升高,压力下降!

当温度升高或柱温升高时,当其接近试剂的沸点时,试剂蒸发并产生气泡。试剂中已经含有微小的气泡,加热会产生气泡。

当压力下降时,微气泡会长大,许多小气泡很容易聚集成大气泡,影响了实验的正常进行。

气泡产生的原因及解决方法如下:

一、 泵头和吸入管。

1、泵头:泵头是压力变化最剧烈的地方,也是最容易产生气泡的地方。泵头靠负压吸液,负压必然使流动相中的小气泡长大。当泵腔变为正压时,气泡可能不会全部变小并流入后续液路。因此,气泡会在泵腔内积聚,从而影响抽吸精度。鉴于此,泵头特别设计有排气装置,气阀便于泵头排气。稳定的柱压表明泵头排气成功。

2、白色的管子里有长长的气泡。

a、 白色移液管与空气接触时漏气,产生可见气泡。吸入白管是大气压力和负压的变化部分。泄漏是大气进入白管,但管内液体不易观察。

处理方法:更换白管。

b、 滤头堵塞:滤头堵塞导致流入滤头的液体速度下降,泵强行吸液产生真空气泡。

判断:当滤头被拔出且没有气泡时,表示滤头堵塞。

处理方法:A.用30%硝酸溶液清洗滤头约20分钟。

B、 用水冲洗滤头,注意多次换水。

c、 流动相的蒸发产生气泡。

特别是在夏季,室温高、沸点低的试剂,如醋酸、氨、石油醚等,易挥发。

治疗:超声波,室温。

二、 检测流动池中的长气泡。

流动池是气泡容易积聚的地方,对基线有很大的影响。流动相进入色谱柱后,压力越来越小,微气泡逐渐长大。如果流动池的横截面积远大于钢管的横截面积,则气泡很容易在胞内生长。气泡的特点是在没有外压的情况下,很难收缩到钢管内部,很难通过下面的流动池流出,所以在流动池内有一个水池。

治疗方法:1。对于差分检测器(差分检测池只能承受几公斤的压力),只能反复冲洗,提起废液瓶,通过废水管中的液柱向罐内增加一个小的背压,因此差分池排气困难,但没有其他办法。

三、 当基线杂乱不规则时,应考虑气泡。

1、反复调整背压装置的压力,直到基线稳定。

2、手动排气气泡程序。

a、 拆下背压装置,连接备用钢管。

b、 泵吸入,检测器零。

c、 在现有塔压基础上增加50kg压力上限保护。例如,如果当前色谱柱压力为60kg,Pmax可以设置压力上限为110kg

d、 手动封堵废液钢管出液端,观察泵柱压力上升,同时观察检测器显示屏上AV值的变化。

如果罐内有气泡,则手动堵住废水管,A值会急剧变化。当手松开时,AV值又会上升,说明罐内有气泡,但没有排出。当手动堵塞和松开废水管时,当AV值基本不变时,证明排气气泡是成功的,基线将是稳定的。

四、 垃圾桶里有气泡